用1.5ml的無菌EP管，移液器移取560μl AVL裂解液，加入5.6μl Carrier RNA，加入140μl的已滅活的待提取核酸的待測樣本，渦旋振蕩15s，室溫靜止10min。將上述EP管放入離心機內瞬時離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產物，防止污染。裂解完成后，加入560μl無水乙醇，振蕩混勻15s，將上述EP管放入離心機內瞬時離心以去除可能殘留在EP管蓋上的裂解產物，防止污染。

  向離心柱加入裂解產物630μl，8000轉離心1min（可參考海昌儀器型號：TG-16R臺式微量冷凍離心機），若離心機在生物**柜之外，每次使用都需進行外表面**。更換新廢液收集管，要從離心機中小心取出離心柱，將上層離心柱轉移到新收集管中，繼續(xù)將剩余裂解產物630μl加入離心柱中，若樣本體積大于140μl時需重復此步驟，直到全部裂解產物都過柱離心，8000轉離心1min，小心將離心柱轉移到新的收集管中。

  取500μl AW1加入離心柱中（注意，此處加樣操作時務必將移液器吸頭接觸離心柱內壁緩慢加樣），8000轉離心1min。小心取出離心柱，更換新的收集管。

  取500μl AW2加入離心柱中，14000轉離心3min（可參考海昌儀器型號：TG-16R臺式微量冷凍離心機） ，小心取出離心柱，更換新的離心柱上端收集管，置于離心機中使用*大轉速離心1min，以確保將AW2中的殘液完全離心干凈。

  取無菌1.5mlEP管收集核酸，將離心柱上端小心放入1.5mlEP管中，取40-60μl的洗脫液AVE加入到離心柱中（注意：洗脫液應盡量全部覆蓋住離心柱膜），用EP管管蓋蓋住離心柱，使用無菌剪刀剪去原離心柱管蓋。

  室溫靜止1min，將其放入離心機中8000轉離心1min，回收核酸。丟棄離心柱，EP管中即為獲取的提取核酸，做好標記與登記。